LightCycler® 480 是瑞士 Roche 公司推出的一款高性能实时荧光定量 PCR 系统,是经典 LightCycler 系列的代表性产品。该系统集成了 Roche 在实时荧光定量 PCR 领域数十年的技术积累,结合创新的温控系统与高灵敏度光学检测技术,为基因表达定量、基因分型及高分辨率熔解曲线分析提供了卓越的解决方案。
该仪器被广泛用于基础医学研究、临床诊断、药物研发、农业科学及微生物检测等领域,以高精度、高重复性和高通量性能满足从常规实验室到大型研究平台的各种需求。
银质热模块:采用导热性能优异的银质热循环模块,搭配创新的 Therma-Base™ 热循环专利技术,确保热量在整块板上的均匀分布,彻底消除“边缘效应”。
卓越的温度均一性:孔间温度均一性达 ±0.1 ℃,确保每个反应孔在相同条件下的扩增效率一致,是实现高重复性定量结果的关键。
快速升降温:最大升温速度达 4.8 ℃/s,完成 40 个 PCR 循环仅需约 40 分钟(384 孔板),显著提升实验效率。
灵活模块更换:用户可在数分钟内自行更换 96 孔和 384 孔加热模块,无需工程师到场和重新校准,满足不同通量需求。
高强度氙灯激发光源:采用宽光谱范围的高强度氙灯,提供从紫外到可见光的连续激发光谱,无需使用 ROX 等内参染料即可获得优异信号。
冷 CCD 检测器:配备高灵敏度冷 CCD 相机,可同时采集整块板的所有孔信号,确保数据采集的一致性和稳定性。
灵活的多重检测能力:系统配备 5 个激发通道(440-618 nm)和 6 个发射通道(488-660 nm),支持多达 4 重荧光检测,兼容所有主流检测模式(SYBR Green I、TaqMan 水解探针、杂交探针、SimpleProbe 等)。
性能指标 参数
灵敏度 可检测单拷贝基因
动态范围 10个数量级(1-10¹⁰拷贝)
重复性 CV(变异系数)< 0.15%(Cp值)
分辨率 可区分 1.5 倍浓度差异,置信度 ≥ 99.8%
反应体系 5-20 μL(384孔)/ 10-100 μL(96孔)
仪器尺寸 57.4×58.8×49.7 cm,重量约 55.6 kg
LightCycler® 480 配备强大的分析软件,支持以下检测模式:
绝对定量:通过标准曲线精确定量起始模板拷贝数
相对定量:适用于基因表达差异分析(如 2⁻ΔΔCt 法)
基因分型:支持终点法和熔解曲线法进行 SNP 检测
高分辨率熔解曲线分析(HRM):高灵敏度检测 DNA 序列变异
产物鉴定:通过熔解曲线分析扩增产物的特异性
荧光染料:SYBR Green I、ResoLight HRM dye
水解探针:TaqMan 探针、UPL 探针
杂交探针:HybProbe(单色或多色)
简单探针:SimpleProbe
基因表达定量与调控研究
病原微生物核酸定量检测
Micro RNA 研究
DNA 甲基化研究
肿瘤标志物检测与新药开发
动物疫情检测与疾病早期诊断
试剂开放:兼容市面上绝大多数荧光染料和第三方 qPCR 试剂盒
耗材开放:支持国产或进口的 8 连管、96 孔板和 384 孔板
自动化兼容:可配 LIMS 系统及自动进样机械臂,实现高通量自动化运行
无需 ROX 校正:独特的光学设计省去内参染料成本
封板膜要求:建议使用 Roche 原厂封板膜,避免劣质膜高温融化损伤热盖
操作规范:操作时请勿佩戴有粉末的乳胶手套或裸手接触光学透性封板膜
程序设置:反应最后一步必须降温至 40℃,维持至少 30 秒
预约使用:多数共享平台需提前预约,具体以各机构管理规定为准