ACQUITY UPLC 是美国沃特世(Waters)公司推出的一项革命性液相色谱技术,标志着液相色谱分离科学进入了全新的时代。作为超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography) 的开创者,UPLC技术基于亚2微米颗粒技术,在色谱性能上实现了对传统HPLC的全面超越。
ACQUITY UPLC系统通过同时重新设计色谱柱、泵、进样器和检测器,实现了分离科学的整体性创新。该技术显著提高了分析的分辨率、灵敏度和速度,同时减少了溶剂消耗,降低了运营成本。凭借全球数千篇同行评审论文和众多应用文献的验证,UPLC技术已成为全球领先制药公司、研究机构和检测实验室的标准化平台。
传统HPLC使用5μm或3μm粒径的色谱柱填料,而UPLC技术采用亚2微米(<2μm)杂化颗粒作为色谱柱填料。这一变革带来的性能提升包括:
| 性能指标 | 相比传统 HPLC 的改进 |
|---|---|
| 柱效 | 提高 3 倍以上 |
| 分辨率 | 提高 70% 以上 |
| 分离效率 | 提高 9 倍以上(同分辨率下) |
| 灵敏度 | 提高 70% 以上 |
| 分析时间 | 缩短至 1/3 - 1/10 |
根据色谱理论,分离效率与颗粒大小成反比。当填料粒径从5μm减小到1.7μm时,理论塔板数(柱效)可提高3倍,而分辨率可提高70%以上。与此同时,UPLC系统能够在3倍以上的线速度下运行,使分离效率提高9倍以上,同时保持分辨率不降低。
分辨率革命:
在标准测试中,美国药典的醋氨酚与咖啡因色谱峰分离,传统HPLC只能勉强分离,而UPLC系统可以实现基线分离。ACQUITY UPLC系统提供的分辨率更高,同时还能保持生产效率。
速度与灵敏度兼得:
UPLC系统能够在保持分辨率不变的情况下,将分析时间缩短到原来的1/10。更重要的是,由于峰形更窄、更集中,信号高度显著增加,灵敏度比传统方法提高70%。
三维性能同时提升:
在有选择性提高柱温时,UPLC系统可以同时获得更好的分辨率、更高的灵敏度和更高的生产效率——这是HPLC无法企及的。
Waters提供了多款ACQUITY UPLC系统,以满足不同的实验室需求:
| 型号 | 泵类型 | 最高压力 | 流速范围 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|
| ACQUITY UPLC(基础型) | 二元高压 | 15,000 psi | 最高 2.2 mL/min | 日常 UPLC 分析,性能与成本平衡 |
| ACQUITY UPLC I-Class | 二元高压 | 15,000 psi | 最高 2.2 mL/min | 最高分辨率,适合与质谱联用 |
| ACQUITY UPLC H-Class | 四元低压 | 15,000 psi | 最高 2.2 mL/min | 常规分析,方法开发,HPLC到UPLC过渡 |
| ACQUITY UPLC M-Class | 二元高压 | 15,000 psi | 200 nL-100 μL/min | 纳升/微升级分离,蛋白组学,珍贵样品 |
| ACQUITY UPLC H-Class Bio | 四元低压(生物兼容) | 15,000 psi | 最高 2.2 mL/min | 生物大分子分析,保持样品完整性 |
ACQUITY UPLC(基础型) :
基础二元系统,是UPLC技术的完美体现。该系统既保留UPLC技术的高分离度、高灵敏度和高通量优势,又具备适当的灵活性和经济性,是实验室日常UPLC分析的最佳选择。
ACQUITY UPLC I-Class:
拥有最低的系统扩散,是ACQUITY UPLC系列中分辨率最高的二元系统,特别适合与质谱(MS)联用,能够从有限的或复杂基质样品中获得最深度的信息。
ACQUITY UPLC H-Class:
四元系统,结合了HPLC的灵活性和UPLC的高性能,支持多溶剂筛选和复杂梯度开发,是从传统HPLC向UPLC过渡的首选平台。
ACQUITY UPLC M-Class:
纳升级至微升级分离系统,专为样品量极为有限的应用设计,如蛋白组学、生物标志物发现。该系统可提高LC/MS分析灵敏度达10倍以上。
ACQUITY UPLC H-Class Bio:
生物兼容型四元系统,采用不含铁的流路,特别适合生物大分子(蛋白质、抗体)的分析,保持样品完整性,最大限度减少残留。
| 项目 | 规格参数 |
|---|---|
| 型号 | ACQUITY UPLC |
| 最高操作压力 | 15,000 psi |
| 泵类型 | 二元高压梯度系统 |
| 流速范围 | 最高 2.2 mL/min |
| 色谱柱技术 | 亚 2 微米杂化颗粒(BEH、HSS、CSH 等) |
| 检测器选项 | TUV(紫外)、PDA(二极管阵列)、FLR(荧光)、ELSD(蒸发光散射)、MS(质谱) |
| 软件平台 | Empower、MassLynx |
| 方法转换 | 内置 UPLC 计算方法,支持 HPLC 到 UPLC 的简单转换 |
| 兼容性 | 可与第三方质谱仪兼容 |
UPLC技术是分辨率最高的液相色谱技术之一。在需要鉴定复杂混合物(如天然产物提取物、环境样品、生物流体)中的化合物时,这一点至关重要。美国药典标准测试中,UPLC将醋氨酚与咖啡因色谱峰的分离度提高了一倍以上,实现了基线分离。
相比传统HPLC,分析时间平均缩短3-10倍。以药品质量控制为例,原本需要30分钟的分析可在3分钟内完成,每天可分析的样品数量增加近10倍。
由于峰形更窄、更集中,信号高度更高,灵敏度提升70%以上。在质谱(MS)检测中,优势更为明显。对于药物代谢、杂质分析等要求较低检测限的应用,UPLC技术提供了无与伦比的灵敏度和专属性。
溶剂消耗:减少高达90%以上的溶剂使用量
废液处理成本:显著降低
运营成本:每份样品的分析成本大幅下降
ACQUITY UPLC系统内置UPLC计算方法,支持从HPLC方法到UPLC方法的简便几何转换。同时,ACQUITY H-Class系统可直接运行现有HPLC方法,让实验室能够在面向未来的平台上进行平滑过渡。
UPLC技术受到全球领先的制药、食品、环境实验室的全面标准化采用,发表论文上千篇,具有坚实的技术积累和实践验证。
| 应用领域 | 典型应用 |
|---|---|
| 药物分析 | 药物活性成分定量、杂质分析、溶出度测试、稳定性研究 |
| 生物分析 | 药代动力学(PK)、生物等效性(BE)、临床前 ADME 筛查、生物标志物分析 |
| 蛋白组学与生物制药 | 完整蛋白分析、肽图分析、单克隆抗体(mAb)表征、翻译后修饰鉴定 |
| 代谢组学 | 生物标志物发现、代谢物鉴定、代谢指纹图谱分析 |
| 食品安全 | 农药残留、兽药残留、添加剂检测、天然毒素筛查 |
| 环境监测 | 水质分析、土壤污染物检测、持久性有机污染物(POPs)分析 |
| 临床诊断 | 治疗药物监测(TDM)、新生儿筛查、维生素检测 |
| 法医毒理 | 毒物筛查、毒品鉴定 |
| 天然产物 | 中药活性成分分析、植物提取物指纹图谱 |
ACQUITY UPLC系统配备多种优化的检测器,以获得最佳的检测结果:
| 检测器类型 | 检测原理 | 适用化合物 |
|---|---|---|
| TUV(可调紫外)检测器 | 紫外吸收 | 具有紫外吸收的化合物,高灵敏度要求 |
| PDA(光电二极管阵列)检测器 | 全波长紫外-可见吸收 | 峰纯度鉴定、方法开发、未知物分析 |
| FLR(荧光)检测器 | 荧光发射 | 天然荧光化合物、荧光标记物、痕量分析 |
| ELSD(蒸发光散射)检测器 | 光散射 | 无紫外吸收化合物(如糖类、脂类、聚合物) |
| QDa 质谱检测器 | 质荷比 | 结构确认、痕量定量 |
| 单四极杆质谱(MS) | 质荷比 | 常规定性定量、峰鉴定 |
| 串联四极杆质谱(MS/MS) | 质荷比 | 痕量分析、结构鉴定、代谢物鉴定 |
| 飞行时间质谱(Q-Tof) | 高分辨质谱 | 未知物鉴定、完整蛋白分析、代谢组学 |
ACQUITY UPLC系统支持从传统HPLC方法的便捷转换:
| 转换维度 | 传统 HPLC(5µm 颗粒) | UPLC(1.7µm 颗粒) |
|---|---|---|
| 色谱柱长度 | 150 mm | 50 mm(缩短 1/3) |
| 流速 | 1.0 mL/min | 0.6 mL/min |
| 进样量 | 10 µL | 2 µL |
| 运行时间 | 10 min | <1 min |
| 溶剂消耗 | 10 mL/样品 | 0.6 mL/样品 |
| 柱效 | ~10,000 塔板 | ~12,000 塔板 |
通过这种转换,实验室能够在不损失柱效的前提下,将分析速度和效率提升5-10倍。
色谱柱选择:选择适合的ACQUITY UPLC色谱柱(BEH、HSS、CSH等固定相),根据分析目标进行选择
样品过滤:所有样品和流动相必须通过0.2 µm滤膜过滤,防止颗粒堵塞色谱柱
压力监控:系统最高压力为15,000 psi,使用时应关注压力变化
方法转换:使用UPLC计算器进行HPLC到UPLC的几何放大,保证方法转换的成功率
检测器设置:数据采集速率需设置足够高(通常>20 Hz),以保证亚2微米颗粒形成的尖峰具有足够的数据点
维护保养:定期更换密封圈、过滤器等易耗品,保持系统性能
预约使用:多数共享平台需提前预约,具体以各机构管理规定为准
Waters ACQUITY UPLC 超高效液相色谱系统凭借其亚2微米颗粒色谱技术、15,000 psi的最高操作压力、高达70%的分辨率和灵敏度提升以及5-10倍的分析效率提升,已成为全球液相色谱领域的一项革命性技术。
该系统的核心价值在于:
性能标杆:亚2微米颗粒技术带来的3倍柱效、70%分辨率提升、70%灵敏度提升
效率突破:分析时间缩短3-10倍,溶剂消耗减少90%以上
全面解决方案:从基础型ACQUITY UPLC到最高分辨率的I-Class,从四元系统H-Class到纳升系统M-Class,满足多样化需求
合规性就绪:支持Empower软件,符合21 CFR Part 11等法规要求
全球化验证:数千篇论文和应用文献支持,全球领先机构标准化采用
无论是药品质量控制中的杂质分析、生物分析中的药代动力学研究、食品安全中的残留检测,还是蛋白组学中的肽图鉴定,ACQUITY UPLC系列都能提供高分辨率、高灵敏度、高通量的可靠液相色谱解决方案,助力科研人员和企业实验室提高分析效率与数据质量。